POD国标测定(测试国标)

金生365小时前

gop-pod注意事项

GOPPod法注意事项如下:标本准备:新配制的葡萄糖标准液主要是α型,需放置2小时以上,以达到变旋平衡后方可应用测定标本以草酸钾氟化钠为抗凝剂的血浆效果较好,抗凝剂配比为草酸钾6g、氟化钠4g,溶解至100ml水,可使血液在3~4天内不凝固并抑制糖分解。

本法操作中应直接将标本加至试剂中,并通过吸试剂反复冲洗吸管,确保结果的可靠性。对严重黄疸、溶血及乳糜样血清样本,应先制备无蛋白血滤液,然后进行测定。葡萄糖氧化酶法的线性范围广,回收率高,批内CV低,批间和日间CV控制在合理范围内。

新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。2.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高,可干扰过氧化物反应,造成结果假性偏低。3.测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好。

将所有试管轻轻摇匀,确保试剂充分混合。将试管放入37℃的水浴中保温15分钟,让反应充分进行。比色操作:在波长505nm处对所有试管进行比色操作。以空白管为基准调整零点,然后读取标准管和测定管的吸光度。通过以上步骤,可以准确地测量血糖浓度。

果蔬中过氧化物活性的测定

实验所需材料包括各种果蔬,以及研磨设备、离心机、分光光度计等仪器,以及醋酸缓冲液、愈创木酚、H2O2等试剂。具体制备过程中,需先制备酶液,通过研磨果蔬并离心提取酶提取液,然后进行活性测定,通过在特定波长下测定吸光度变化,计算出每分钟吸光度变化值,以此确定过氧化物酶的活性。

POD国标测定(测试国标)

果蔬中过氧化物酶活性的测定主要通过愈创木酚法进行。具体方法和注意事项如下:测定方法: 原理:过氧化物酶催化H2O2氧化酚类物质,产生有色化合物。在愈创木酚法中,POD催化H2O2将愈创木酚氧化为红棕色的4邻甲氧基苯酚,该物质在470 nm处有高光吸收,因此可利用比色法测量其活性。

在测定过氧化氢酶活力时,我们通常会测量反应溶液在特定波长下的吸光度值。随着过氧化氢酶的活性增加,反应溶液的吸光度会随时间而降低。根据吸光度的变化,可以计算出过氧化氢酶的活性单位,通常以每克鲜重(FW)果蔬样品每分钟吸光度变化值增加1时为1个过氧化物酶活性单位(U)。

植物体内过氧化物酶活性的测定

植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。

植物组织中过氧化物酶活性测定通常采用光度法或荧光法。在植物组织中测定过氧化物酶活力时,反应液需要预冷,以防止酶的活性受到温度的影响而降低。通常会使用冷冻离心机冷却反应液,并在试验过程中保持反应液温度低于室温的情况下进行测定。

过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化。

测定过氧化物酶活性还可以帮助确定植物在特定环境下的适应能力。通过比较不同环境下植物体内过氧化物酶的活性,可以评估植物对环境的适应性和耐受性。评估植物的抗逆性:过氧化物酶与植物的抗逆性密切相关。

以下是测定过氧化物酶活性的常见实验方法和步骤:实验材料和试剂:植物组织或动物组织样本:可以使用新鲜组织或者离心后的组织匀浆。氢过氧化物溶液:通常使用3%的氢过氧化物作为底物。洗涤液:常用生理盐水或磷酸盐缓冲液。过氧化氢酶停酶溶液:用于停止过氧化物酶反应的溶液,如甲酸等。

植物组织pod活性的测定注意事项

待测样品中不能含有酶抑制剂,同时需避免反复冻融。 POD酶液提取时,注意低温操作,防止酶活性。 以煮沸的酶液为对照时,酶要充分失活。 POD氧化剂具有一定腐蚀性,请小心操作。 POD氧化剂易挥发,请密闭保存,否则检测效率下降。 如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,每次检测指标不宜过多,否则操作时间不一,有可能导致样本间的差异。

植物体内过氧化物酶(POD)活性的测定通常采用光度法或荧光法。光度法:将植物组织或提取物加入含有过氧化氢和双甲基苯酚的反应液中,过氧化物酶催化过氧化氢分解产生的游离基与双甲基苯酚发生氧化反应,生成苯醌衍生物,产生黄色或棕色的化合物。可以通过测定反应液的吸光度或比色板的读数来测定POD活性。

植物POD活性的正常范围是440.327~52463U/g。这个范围是通过对大量植物样品的测量得出的平均值和标准差。POD活性的单位是U/g,表示每克植物组织中的过氧化物酶活性。POD活性的测量通过酶学方法进行,常用的是测定POD催化反应产生的染色产物的吸光度变化。这种测量方法可以反映出植物体内POD的活性水平。

pod测定方法

pod酶活性测定方法有定时法、连续监测法、平衡法。定时法 通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或物的变化。优点:简单易行,对试剂要求不高。缺点:难保证测定结果的真实性。

.5 g叶片加入50 mmol L-1磷酸缓冲液(pH8,含2%的聚乙烯吡咯烷酮),研磨,4℃ 8000 r/min离心20 min,上清液定容至5 ml。

POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。SOD(超氧化物歧化酶活性)的测定 试剂:① 0.05mol/l磷酸缓冲液(PH值为8)。

计算酶活力方法多样,可分别计算每分钟内四个△A吸光度,求平均值得到最终结果。另一种方法是先计算吸光度变化的平均值,再代入公式求得酶活力。若用第一个值减去第五个值后除以4min,结果可能不准确,因为酶促反应速度并非匀速。酶活性只有在特定时间内呈线性增加趋势。

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